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  • 2022-10-26

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实验室离心机应用领域广泛,一般用于医院化验室、科研机构化验室、食品药品检验化验室、食品卫生化验室等各种实验室。今天东南仪诚为大家介绍如何根据实验需求选择离心机、离心管类型,以及离心机操作注意事项和安全风险防范。

一、离心机的分类

按结构类型可分:台式离心机和立式离心机(落地式离心机)

按分离方式可分:过滤离心机和沉降离心机

按速度快慢可分:低速离心机(10000rpm/min)、高速离心机(10000-30000 rpm/min)、超高速离心机(30000rpm/min)

按容量大小可分:微量离心机(微型离心机或迷你离心机)、小容量离心机、大容量离心机和超大容量离心机

按有无冷冻可分:冷冻离心机和常温离心机

另外还按用途的不同进行分类。

二、如何选择离心机的类型

1.当固相物料为结晶产品时,要求分离时结晶的破损程度低

要根据离心机须根据悬浮液(或乳浊液)中固体颗粒的大小和浓度、固体与液体(或两种液体)的密度差、液体粘度、滤渣(或沉渣)的特性来选择。

2.当分离物质颗粒的直径在1微米到50微米之间,可用低速离心机分离

转速大约在4000转/分钟到7000转/分钟,相对离心力约为2000g到9420g, 一般采用台式低速离心机或落地式低速大容量离心机。

3.当分离动植物组织内的病毒等直径约为0.1微米到1微米的物质时,建议采用高速冷冻离心机,转数为 10000转/分钟到20000转/分钟,离心力约为10000g到100000g。

4.当分离各种蛋白质、DNA、RNA等直径约为0.002微米到0.1微米的组分时,则需要用超速离心机,转速在40000转/分钟以上,离心力要求达到100000g到400000g以上。

5.当物料含有苯、甲苯、石油醚、环戊烷;二氯乙烷、四氯化碳、甲醇、乙醇、乙醚、甲乙醚、、丙酮、环已酮、乙二醇-乙醚、乙二醇-丁醚、甲醛、乙醛、吡啶等易燃易爆的物品时,应选择防爆离心机

6.当分离一些有机活性物质如酶等时,需要分离过程中保持恒温时选择冷冻离心机。

三、如何计算离心力

离心分离的沉降效果由相对离心力(RCF: Relative Centrifugal Force)决定。相对离心力定义为离心加速度与重力加速度的比值,按以下计算公式计算得出:(g: 重力加速度,R:离心半径 cm,N: 转速 rpm)

水平转子、角转子、垂直转子的转子离心

四、离心机安装注意事项

1.离心机一般安装在坚固的水平地面或者台面, 避免阳光照射的地方。通过调整4个脚轮旁边的调整螺栓的高低,来调整离心机安装处于水平位置, 注意不要一个脚轮悬空。

2.离心机散热量比较大,周围不要堆放杂物,离心机离周围物品至少30cm以上。同时,离心机尽量单独放在一个房间,周围绝对不要放有机试剂、易爆品、易燃品。

3.离心机应使用稳定的额定电压,最好单独一个插座,外壳必须有可靠接地线。

五、如何选择离心管

玻璃离心管:不能在高、超速离心机上使用,只适用于低速离心机。

PA管和PP管:化学性能稳定,半透明,能耐高温消毒。

PC管:透明度好,硬度大,能耐高温消毒。但不耐强酸强碱及某些有机溶剂。主要用于5万(转/分)以上离心。

CN管:质地较软,透明,但不耐强酸强碱及某些有机溶剂,不能高压消毒。适合于蔗糖、甘油等密度梯度离心。透明,利于收集。

钢制离心管:强度大,不变形,能抗热,抗冻,抗化学腐蚀,应用广泛,但使用时避免接触强腐蚀性的化学药品。

注意:

(1)塑料管使用有机溶剂必须符合与对应材料的相容性规定,聚丙烯(PP)离心管(瓶)不能与汽油、煤油等接触使用。聚碳酸酯(PC)离心管(瓶)不能与汽油、乙醛、丙酮、乙醇、异丁醇、甲酚等接触使用。聚乙烯(PE)离心管(瓶)不能与硫酸(50%、75%)、苯、汽油、煤油等接触使用。

(2)离心管在高温高压下消毒,离心管要和管帽分开,如果拧合后一起消毒,容易引起离心管的变形而在实验过程中发生危险。

六、离心管安装注意事项

1.使用各种离心机时,必须事先在天平上精密地平衡所有的离心管、离心管盖、挂篮和适配件等。平衡时重量偏差不得超过离心机说明书上所规定的范围。

(1)重量配平,一般精密平衡要求偏差不超过0.1g,常规应用则要求一般不超过1g,重量偏差不得超过离心机说明书上所规定的范围。

(2)密度配平,离心管内填充的材料必须密度相近,否则载荷会不均匀地分布。

(3)转子中尽量避免装载奇数个离心管,当转子只是部分装载时应均匀分布,以便使载荷均匀地分布在转子体上。

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(4)当为奇数个离心管时,加载平衡的平衡管内必须采用密度相近的材料填充,例如,从培养基中离心细菌,可以用水平衡。但不可以用水来平衡氯化铯。

2.装载溶液时,要根据离心溶液的性质及体积选用适合的离心管依据离心机的具体操作说明进行。

3.当使用无盖离心管时,液体不能装得过多,以免离心时甩出,造成转子不平衡、生锈或被腐蚀。

4.当使用盖密封离心管要求抽真空时,一般要求必须将液体装满,以防止离心时塑料离心管的上部因真空变形。

七、如何选择离心方法

常用的三种离心方法:差速离心法;速率区带离心法;等密度区带离心法。

1.差速离心法

差速离心法

差速离心法常用于生化样品的粗制品提取利用不同的悬浮粒子在离心力场中沉降系数的差别,在同一离心条件下,不同粒子沉降速度不同,通过不断增加相对离心力,使一个非均匀混合液体分散系统中各种大小、形状不同的粒子分层沉淀。

操作过程中一般是在第一级离心后将上清液与沉淀分开,然后将上清液再在更高转速条件下离心,分离出第二部分沉淀,如此往复逐级加高转速,逐级分离出所需要的物质。差速离心的分辨率不高,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开,常用于生化样品的粗制品提取。

2.速率区带离心

速率区带离心

速率区带离心是一种不完全的沉降分离,沉降效果受物质本身物理尺度的影响较大,一般应用在物质大小相异而密度相同的情况, 是指根据待分离的粒子在离心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内,形成几条分开的样品区带,达到彼此分离的目的。

比如要从静脉血中分离出单个核细胞,前一种分离液Ficoll将血液中的所有单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)分为一个层,同时提取。而Percoll分离液将血液中淋巴细胞和单核细胞分为两个梯度层,分别提取。梯度液在离心过程中以及离心完毕后取样时,起着支持介质和稳定剂的作用,避免因机械振动而引起已分层的粒子重悬。

采用速率区带离心法时,需要严格控制离心时间,既要有足够的时间使各种粒子在介质梯度液中形成区带,又要避免任一待分离粒子形成沉淀状态。

3.等密度区带离心法

等密度区带离心法

等密度区带离心是指液体分散体系中不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场下,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上,即等密度点,形成区带的离心方法。

等密度区带离心的离心效果取决于颗粒的浮力密度差,密度差越大,分离效果越好,与颗粒的大小和形状无关,但后两者决定着达到平衡的速率、时间和区带的宽度。

等密度区带离心方法的特点:

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(1)与样品粒子的密度有关;

(2)与样品粒子的大小和其他参数无关 ;

(3)转速、温度不变,则延长离心时间也不能改变这些粒子的成带位置。

八、离心机使用注意事项及风险预防

1.离心管平衡时,由于天平长期使用而又未能校对,对称放置的离心管不平衡超过了离心机允许的样品称量误差。

2.离心过程中溶液填充不合理或者未盖罐盖,离心腔内的高真空状态造成离心管破裂和样品液外溢,造成转子不平衡而发生轴弯曲或断轴事故。

3.离心管老化或将高速离心机离心管用在超速离心机上,导致离心管在运行时破裂,样品液外溢造成失衡,使轴弯曲。

4.驱动轴和转子等材料有内伤未定期检测,导致离心机发生事故。

5.使用甩平转子时,不细心地将吊篮的序号与甩平转子主体的序号装错,影响转子的动平衡。

6.离心管帽内橡胶密封环和转子盖橡胶密封环使用不当和消毒不当,如长期使用内部断裂和高温消毒(使用干燥箱烘烤)等处理而老化龟裂等缺陷导致密封失效,样品在高速运转时外溢,引起转子在不平衡状态下运行。

7.由于工作中粗心大意,转子盖没有拧紧或是将转子盖和转子柄互换,造成螺纹不吻合,当开机运行时,转子盖抛出而发生严重的断轴事故。

8.离心管在装样时,因样品液未装满或离心管帽没有拧紧密封,在离心过程中离心腔内的高真空状态造成离心管变形、破裂和样品液外溢,造成转子不平衡而发生轴弯曲或断轴事故。

9.由于原样品的比重不等于配平液的比重,转子动平衡失调而发生事故。

10.管帽混用(两者比重不同)而发生事故。

11.对于各种材料的离心管,使用前没能仔细了解厂家要求的离心管使用范围和消毒方法,采用化学溶剂和不适当的消毒液处理,造成离心管在运行中溶胀、破裂而发生事故。

12.由于使用寿命管理不当和各种腐蚀损伤等,转子在运行中发生爆裂。

13.由于粗心大意,安装时未将驱动系统或其它系统的固定件去掉,并强行使仪器试运转而发生断轴和转子爆炸事故。

实验室科研过程中经常使用各种化学药品和仪器设备,会遇到有高低温、高低压的的实验条件和高电压、高频和带有辐射源的仪器设备,如果人员培训不足,很可能会导致安全事故。

东南仪诚提醒大家一定要注意加强安全意识,定期检测维护设备,积极预防准备工作,避免上述安全隐患。

如需了解更多仪器设备使用信息、详细参数和检测维护方法,欢迎登录实验室信息网或东南仪诚网站查看咨询。

相信大家应该知道进行促排卵是我们试管婴儿助孕过程当中一个非常重要的环节,而且这个环节决定了我们试管婴儿治疗后期当中所能够获得卵子、胚胎的数量还有质量。在促排期间女性朋友该如果做才能可以养护好卵巢,从而使得自己可以获得一个满意的妊娠结局呢,另外,试管婴儿治疗过程当中取卵方面的问题具体该如何理解呢,针对这些疑问,今天来给大家一一分析,拿好小板凳,认真听好哦。

促排卵会不会导致卵巢早衰

其实上述提到的这写问题是众多进行试管婴儿治疗的女性都非常关注的的问题。特别是试管婴儿促排后女性会不会卵巢早衰,我们都知道在自然周期当中,一个月女性仅仅只有一个卵泡得以发生并且排卵,而试管婴儿的促排卵后一次性排了这么多颗卵子,这样做会不会加速女性卵巢的衰老吗?可以明确地告诉大家:不会。

促排卵的治疗并没有打扰到女性卵泡池当中的始基卵泡,一般1到2次的试管婴儿促排卵治疗并不会加速卵巢衰老的速度。而且对于排卵障碍问题或是人工授精的促排卵来说,在每个周期当中大约生长1到2个卵泡,这个情况就更不必担心了。

那么, 试管婴儿取卵少的原因是什么?

 一、试管获得卵子数少可能得因素有哪些?

通过我们前面简单的理解诶试管婴儿促排卵的原理,我们应该知道在试管婴儿助孕的过程当中,造成获卵数短目少的原因也显得更为容易理解了。主要有以下这些原因:

(1) 高龄因素:因为女性的卵泡池当中的卵子的数目会随着女性的年龄的增加而逐年减少,导致促排卵取卵所能够获得的卵子的数量也将变得越来少。

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(2) 卵巢早衰:对于少数年轻人来说,卵巢的提前衰老,以及卵泡池当中卵子数目的提前变少这些情况会导致,试管婴儿促排卵治疗在取卵的时候所能够获得到的卵子的数量也将变少。

(3) 卵巢低反应:卵泡池当中的卵泡如果对外源性给予的促卵泡的生长激SU反应比较差的话,则会比较难以成长和成熟,这也将造成你获得的卵子的数量随之变少。

(4) 空卵泡:如果女性的卵泡池当中的基础卵泡的数量并没有什么问题,只是卵泡当中的卵子有所缺失,好比鸡蛋当中只有鸡蛋清而没有鸡蛋黄,这种情况就算取卵后胚胎学家也没有办法找到卵子,这也同样是能够导致获得的卵子数量短少的中医药原因之一。需要注意的是,在实际的临床工作当中,空卵泡综合征的发生概率是相当低的多数患者无需担心这个问题。

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(5) 其他因素:如果取卵技术并不够成熟的话,则有可能会造成卵子的丢失,不过这种情况的发生率也同样是很低的,由于每个取卵医生他们都已经经过了十几年之久的非常严格培训和实际操作,并且正规医院当中取卵的技术经过上级医生的长期观察以及及时的监督后才可具备独自进行取卵手术的资质,因此大家选择有资质的医院进行治疗可以放心这一方面。

 二、哪些患者需要进行卵巢预处理

为了帮助迎来更满意的促排结局,医生通常会为一部分有需要的患者量身定制出个性化的卵巢预处理的治疗方案。

对于患者的卵巢功能是正常的,而且无合并症的患者,一边只需常规去补充叶酸、维生素还有微量元素;规律进行每天的生活,合理进行膳食,缓解心理压力就可以了。

2.对于多囊卵巢综合征(PCOS)、或者是月经不规律、卵巢功能低下的这类患者,我们则可能需要结合患者的一些具体情况,选择最为适合的预处理方案,包括比如有口服短效避孕药来控制女性的月经周期,这样做可以更为顺利地进入到试管婴儿治疗的流程当中。

3.对于那些中枢性低促性腺激SU低性激SU的女性而已,可适当服用一些雌激SU和孕激SU,让内分泌水平能够接近正常低值,从而再增加卵巢对促性腺激SU的敏感性。

 三、促排期间生活上要注意

1、注意休息

促排卵期间女性朋友应该注意不要让自己过度的劳累,特别是促排卵的后期的时候更要注意的是多休息,不要进行重体力的劳动或者是剧烈的活动。

 2、多摄入一些蛋白质

日常应该注意适当多吃一些富含蛋白类的食物,不过任何事都不能过于极端,适当硬多摄入一些蛋白质含量高的食物就可以了,千万不要过量食物。

3、不可剧烈运动

促排治疗期间是可以适当进行运动的,不要应该注意避免出现拿扭转与冲击性非常大的那类动作。如果是自己在家进行锻炼的话,则建议大家不要尝试那些太激烈、和没做过的动作,比如像瑜伽当中一些扭转弯曲类的体式在此阶段就不要贸然去尝试。

4、不可熬夜、远离毒害

注意休息非常重要,促排治疗期间千万不能熬夜,熬夜非常不利于卵泡和子宫内膜的生长,早睡早起,另外,还要督促自己能够保持平和的心态,每天都有良好的睡眠;不要让自己感冒、发烧;不要去接触那些有毒、有害的物质,比如新装修的房屋、或者是避免使用化妆品和香水等。这些作法都是有可能让女性的卵巢能够保持在一个相对好的状态当中的,也可以帮助女性朋友获得到一个更为满意的促排结局。

 四、重视

整个

周期中的注意事项

1、取卵前

在取卵开始前的八小时要注意禁食、禁水,一直到取卵完成后经医生允许之后方可进食,保持情绪方面的放松,对于一些化学物品应该注意尽量远离,别涂指甲油。

 2、取卵后

在取卵后,饮食要以清淡食物为宜,可适当喝一些富含维生素或者是利尿的饮品,比如鲜榨橙汁、葡萄汁等。

3、移植后

为了使妊娠率得到很好的提高,在胚胎移植后,女性务必进行合理的保胎,只有做这样才可以很好地去帮助胎儿更好的着床并成长发育。在胚胎移植后的48小时当中尽量要注意卧床休息,不要出喜爱拿过于剧烈的运动,为了避免便秘的出现,在饮食方面务必选择易消化的食物。

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参考资料

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